DeltaFosB i The Nucleus Accumbens er kritisk for å styrke virkningen av seksuell belønning. (2010)

KOMMENTARER: Delta FosB er en markør for all avhengighet, både atferdsmessig og kjemisk. Ettersom dette molekylet øker i belønningskretsen, gjør vanedannende atferd også. Det er en av molekylene som er involvert i nevroplastiske endringer. Dette eksperimentet viser at det øker med seksuell erfaring, på samme måte som det gjør med narkotikamisbruk. I eksperimentet brukte de genteknologi for å øke nivåene utover "normal". Dette resulterte i forbedret tilrettelegging av seksuell aktivitet. Vi tror dette skjer med pornoavhengighet.

FULLSTUDIE

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genes Brain Behav. 2010 okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Institutt for anatomi og cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, Ontario, Canada.

ABSTRACT

Seksuell oppførsel hos hannrotter er givende og forsterkende. Imidlertid er lite kjent om de spesifikke cellulære og molekylære mekanismer som formidler seksuell belønning eller forsterkende effekter av belønning på påfølgende uttrykk for seksuell oppførsel. Denne studien tester hypotesen om at ΔFosB, den stabilt uttrykte avkortede formen av FosB, spiller en kritisk rolle i forsterkningen av seksuell oppførsel og erfaringsfremkalt tilrettelegging av seksuell motivasjon og ytelse.

Seksuell erfaring ble vist å forårsake ΔFosB-akkumulering i flere limbiske hjernegrupper, inkludert kjernen accumbens (NAc), medial prefrontal cortex, ventral tegmental område og caudate putamen, men ikke den mediale preoptiske kjernen.

Deretter ble induksjonen av c-Fos, et nedstrøms (undertrykt) mål for ΔFosB, målt hos seksuelt erfarne og naive dyr. Antall paringsinducerte c-Fos-immunoreaktive celler ble signifikant redusert hos seksuelt erfarne dyr sammenlignet med seksuelt naive kontroller.

Til slutt ble ΔFosB-nivåer og dets aktivitet i NAc manipulert ved hjelp av virusmediert genoverføring for å studere dets potensielle rolle i å formidle seksuell erfaring og erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell ytelse. Dyr med ΔFosB-overekspresjon viste forbedret tilrettelegging av seksuell ytelse med seksuell erfaring i forhold til kontrollgruppen. I motsetning til dette svekket uttrykket av ΔJunD, en dominant negativ bindingspartner for ΔFosB, seksuell erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell ytelse og hemmet langsiktig vedlikehold av tilrettelegging sammenlignet med grupper som overeksprimerte grønt fluorescensprotein og ΔFosB.

Sammen støtter disse funnene en kritisk rolle for ΔFosB-uttrykk i NAc for de forsterkende effektene av seksuell oppførsel og seksuell opplevelse-fremkalt tilrettelegging av seksuell ytelse.

INNLEDNING

Seksuell oppførsel er svært givende og forsterkende for mannlige gnavere (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Videre endrer seksuell erfaring etterfølgende seksuell oppførsel og belønning (Tenk et al. 2009). Med gjentatt parring erfaring, forenkles eller forsterkes kjønnsadferd, vist ved reduserte latenser for å initiere parring og tilrettelegging av seksuell ytelse (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Imidlertid er de underliggende cellulære og molekylære mekanismene for seksuell belønning og forsterkning dårlig forstått. Seksuell oppførsel og betingede signaler som forutsier parring, har vist seg å forbigå ekspresjon av umiddelbar tidlig gen c-fos i mesolimbisk system av hannrotter (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Videre ble det nylig demonstrert at seksuell erfaring induserer langvarig neuroplasticitet i mannlig rotte mesolimbic systemet (Frohmader et al. 2009; mugger et al. 2010). I tillegg er det på mannlige rotter vist at seksuell erfaring induserer ΔFosB, a Fos familiemedlem, i nucleus accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, en avkortet spleisvariant av FosB, er et unikt medlem av Fos-familien på grunn av sin større stabilitet (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) og spiller en rolle i økt motivasjon og belønning for narkotika av misbruk og den langsiktige nevrale plastisitetsformidlingsavhengigheten (nestler et al. 2001). ΔFosB danner et heteromert transkripsjonsfaktorkompleks (aktivatorprotein-1 (AP-1)) med Jun-proteiner, fortrinnsvis JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Gjennom inducerbart overuttrykk av ΔFosB, primært begrenset til striatum ved bruk av bi-transgene mus, produseres en narkotikaavhengig-lignende atferdsfenotype til tross for mangel på tidligere legemiddeleksponering (McClung et al. 2004). Denne atferdsfenotypen inkluderer en sensitiv lokomotorisk respons på kokain (Kelz et al. 1999), økt preferanse for kokain (Kelz et al. 1999) og morfin (Zachariou et al. 2006), og økt kokain selvadministrasjon (Colby et al. 2003).

I likhet med belønning fra legemidler oppreguleres ΔFosB av naturlig givende atferd og medierer uttrykket av denne atferden. Overuttrykk av ΔFosB i NAc ved bruk av gnagermodeller øker frivillig hjulkjøring ( Werme et al . 2002 ), instrumentell respons på mat ( Olausson et al . 2006 ), sukroseinntak ( Wallace et al . 2008 ), og legger til rette for seksuell atferd hos menn ( Wallace et al . 2008 ) og kvinner ( Bradley et al . 2005 ) . Dermed kan ΔFosB være involvert i å mediere effektene av naturlig givende opplevelser . Den nåværende studien utvider tidligere studier ved spesifikt å undersøke rollen til ΔFosB i NAc i de langsiktige utfallene av seksuell erfaring på påfølgende parringsatferd og nevral aktivering i det mesolimbiske systemet.

  • For det første ble det etablert hvilke hjerneområder som var involvert i belønningskretsene og seksuell oppførsel, uttrykk for sex-opplevelse-indusert ΔFosB.
  • Deretter ble effekten av sex-erfaringsinducert ΔFosB på parringsinducert ekspresjon av c-Fos, et nedstrømsmål undertrykt av ΔFosB (Renthal et al. 2008) ble undersøkt.
  • Endelig ble effekten av å manipulere ΔFosB-aktivitet i NAc (gen over-ekspresjon og ekspresjon av en dominant negativbindende partner) på seksuell oppførsel og erfaringsinducert tilrettelegging av seksuell motivasjon og ytelse bestemt ved bruk av virusvektortilførselsteknologi.

METODER

dyr

Voksne hannrotter av typen Sprague Dawley (200–225 gram) ble innhentet fra Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Dyrene ble plassert i pleksiglassbur med tunnelrør i par av samme kjønn gjennom hele forsøket. Kolonirommet ble temperaturregulert og holdt på en 12/12-timers lys-mørke-syklus med mat og vann tilgjengelig ad libitum, unntatt under atferdstesting. Stimulus-hunner (210–220 gram) for paringsøkter fikk et subkutant implantat som inneholdt 5 % østradiolbenzoat og 95 % kolesterol etter bilateral ovariektomi under dyp anestesi (0.35 g ketamin/0.052 g xylazin). Seksuell mottakelighet ble indusert ved administrering av 500 µg progesteron i 0.1 ml sesamolje omtrent 4 timer før testing. Alle prosedyrer ble godkjent av Animal Care and Use Committees ved University of Western Ontario og var i samsvar med CCAC-retningslinjene som involverer virveldyr i forskning.

Seksuell adferd

Paringsøkter fant sted i den tidlige mørke fasen (mellom 2–6 timer etter at den mørke perioden startet) under svak rød belysning. Før eksperimentets start ble dyrene tilfeldig delt inn i grupper. Under paringsøktene fikk hannrotter kopulere til ejakulasjon på 1 time, og parametere for seksuell atferd ble registrert, inkludert: monteringslatens (ML; tid fra introduksjon av hunnen til første montering), intromisjonslatens (IL; tid fra introduksjon av hunnen til første montering med vaginal penetrasjon), ejakulasjonslatens (EL; tid fra første intromisjon til ejakulasjon), post-ejakulasjonsintervall (PEI; tid fra ejakulasjon til første påfølgende intromisjon), antall monteringer (M; bekkenstøt uten vaginal penetrasjon), antall intromisjoner (IM; montering inkludert vaginal penetrasjon) og kopulasjonseffektivitet (CE = IM/(M+IM)) ( Agmo 1997 ). Antall monteringer og intromisjoner ble ikke inkludert i analysen for dyr som ikke viste ejakulasjon. Latenser for ejakulasjon og intromisjon er parametere som indikerer seksuell motivasjon, mens latens for ejakulasjon, antall parader og kopulasjonseffektivitet gjenspeiler seksuell ytelse ( Hull 2002 ).

Eksperiment 1: Ekspresjon av ΔFosB

Seksuelt naive hannrotter fikk pare seg i rene testbur (60 × 45 × 50 cm) i 5 påfølgende, daglige paringsøkter, eller de forble seksuelt naive. Tilleggstabell 1 skisserer atferdsparadigmet for eksperimentelle grupper: naive uten sex (NNS; n=5), naive sex (NS; n=5), erfarne ingen sex (ENS; n=5) og erfarne sex (ES; n=4). NS- og ES-dyr ble avlivet 1 time etter ejakulasjon på den siste paringsdagen for å undersøke paringsindusert c-Fos-ekspresjon. NNS-dyr ble avlivet samtidig med ENS-dyr 24 timer etter den siste paringsøkten for å undersøke ΔFosB indusert av sexopplevelser. Seksuelt erfarne grupper ble matchet for seksuell atferd før påfølgende testing. Ingen signifikante forskjeller ble oppdaget mellom gruppene for noen atferdsmål innenfor den aktuelle paringsøkten, og sexopplevelsesindusert tilrettelegging av seksuell atferd ble vist av begge erfarne gruppene ( Tilleggstabell 2 ). Kontrollgruppene inkluderte seksuelt naive hanner som ble håndtert samtidig med paringsdyr, noe som sikret eksponering for hunnlukt og vokaliseringer uten direkte hunnkontakt.

For avliving ble dyrene dypt bedøvet med natriumpentobarbital (270 mg/kg; ip) og perfusert intrakardielt med 50 ml 0.9 % saltvann, etterfulgt av 500 ml 4 % paraformaldehyd i 0.1 M fosfatbuffer (PB). Hjernene ble fjernet og etterfiksert i 1 time ved romtemperatur i samme fiksativ, deretter nedsenket i 20 % sukrose og 0.01 % natriumazid i 0.1 M PB og lagret ved 4 °C. Koronale snitt (35 µm) ble kuttet med en frysemikrotom (H400R, Micron, Tyskland), samlet i fire parallelle serier i kryobeskyttelsesløsning (30 % sukrose og 30 % etylenglykol i 0.1 M PB) og lagret ved -20 °C. Frittflytende snitt ble vasket grundig med 0.1 M fosfatbufret saltvann (PBS; pH 7.3–7.4) mellom inkubasjonene. Snittene ble eksponert for 1 % H₂O₂ i 10 minutter ved romtemperatur for å ødelegge endogene peroksidaser, og deretter blokkert i PBS+ inkubasjonsløsning, som er PBS som inneholder 0.1 % bovint serumalbumin (katalogartikkel 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) og 0.4 % Triton X-100 (katalogartikkel BP151-500; Sigma-Aldrich) i 1 time. Snittene ble deretter inkubert over natten ved 4 °C i et pan-FosB kanin polyklonalt antistoff (1:5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB-antistoffet ble dannet mot en intern region som deles av FosB og ΔFosB. ΔFosB-IR-cellene var spesifikt ΔFosB-positive fordi all detekterbar stimulusindusert FosB er degradert ved tiden etter stimulus (24 timer) ( Perrotti et al . 2004 ; Perrotti et al . 2008 ). I tillegg ble dyr som paret seg på den siste dagen (NS, ES) i dette eksperimentet avlivet 1 time etter paring, altså før FosB-ekspresjon. Western blot-analyse bekreftet deteksjonen av ΔFosB ved omtrent 37 kD. Etter inkubasjon med primær antistoff ble seksjonene inkubert i 1 time i biotin-konjugert geite-anti-kanin-IgG (1:500 i PBS+; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) og deretter 1 time i avidin-biotin-hoseradishperoksidase (ABC Elite; 1:1K i PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Etter denne inkubasjonen ble seksjonene behandlet på en av følgende måter:

1. Enkel peroksidasemerking

Seksjoner av NNS- og ENS-dyr ble brukt til en hjerneanalyse av seksuell erfaringsindusert ΔFosB-akkumulering. Etter ABC-inkubasjon ble peroksidasekomplekset visualisert etter behandling i 10 minutter med en kromogenløsning som inneholdt 0.02 % 3,3'-diaminobenzidintetrahydroklorid (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) forbedret med 0.02 % nikkelsulfat i 0.1 M PB med hydrogenperoksid (0.015 %). Seksjonene ble vasket grundig i 0.1 M PB for å avslutte reaksjonen og montert på kodede Superfrost plus-glassplater (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) med 0.3 % gelatin i ddH20 . Etter dehydrering ble alle slidene dekket med DPX (dibutylftalat-xylen).

2. Dual immunofluorescens

Seksjoner fra alle fire eksperimentelle gruppene som inneholdt NAc og mPFC ble brukt til analyse av ΔFosB og c-Fos. Etter ABC-inkubasjon ble seksjonene inkubert i 10 minutter med biotinylert tyramid (BT; 1:250 i PBS + 0.003 % H₂O₂ Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) og i 30 minutter med Alexa 488-konjugert strepavidin (1:100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Seksjonene ble deretter inkubert over natten med et polyklonalt kaninantistoff som spesifikt gjenkjenner c-Fos (1:150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), etterfulgt av en 30-minutters inkubasjon med geite-anti-kanin Cy3-konjugert sekundært antistoff (1:200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). Etter farging ble snittene vasket grundig i 0.1 M PB, montert på kodede glassplater med 0.3 % gelatin i ddH₂O og dekket med et vandig monteringsmedium (Gelvatol) som inneholdt anti-falmemiddelet 1,4-diazabicyklo(2,2)oktan (DABCO; 50 mg/ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunhistokjemiske kontroller inkluderte utelatelse av ett eller begge primære antistoffer, noe som resulterte i fravær av merking i riktig bølgelengde.

Dataanalyse

Brainanalyse av ΔFosB

To forsøkspersoner som ikke var kjent med behandlingen, utførte hjerneskanningen på kodede lysbilder. ΔFosB-immunoreaktive (-IR) celler i hele hjernen ble semi-kvantitativt analysert ved hjelp av en skala som representerte antall ΔFosB-positive celler som beskrevet i tabell 1. I tillegg, basert på semi-kvantitative funn, ble antall ΔFosB-IR-celler telt ved hjelp av standard analyseområder i hjerneområder involvert i belønning og seksuell atferd ved bruk av et kamera lucida-tegningsrør festet til et Leica DMRD-mikroskop (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Tyskland): NAc (kjerne (C) og skall (S); 400 × 600 µm) analysert på tre rostral-kaudale nivåer ( Balfour et al . 2004 ); ventral tegmental area (VTA; 1000 × 800 µm) analysert på tre rostral-kaudale nivåer ( Balfour et al . 2004 ) og VTA-hale ( Perrotti et al . 2005 ); prefrontal cortex (anterior cingulate area (ACA); prelimbic cortex (PL); infralimbic cortex (IL); 600 × 800 µm hver); putamen caudatus (CP; 800 × 800 µm); og medial preoptisk nucleus (MPN; 400 × 600 µm) ( Supplerende figurer 1–3 ). To seksjoner ble telt per subregion, og gjennomsnittet per dyr ble beregnet for beregning av gruppegjennomsnittet. Seksuelt naive og erfarne gruppegjennomsnitt av ΔFosB-IR-celler ble sammenlignet for hver subregion ved hjelp av uparede t-tester.

Tabell 1     

Sammendrag av ΔFosB-uttrykk hos seksuelt naive og erfarne dyr
Analyse av ΔFosB og c-Fos

Bildene ble tatt med et avkjølt CCD-kamera (Microfire, Optronics) festet til et Leica-mikroskop (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Tyskland) og Neurolucida-programvare (MicroBrightfield Inc) med faste kamerainnstillinger for alle forsøkspersoner (ved bruk av 10x objektiver). Antall celler som uttrykker c-Fos-IR eller ΔFosB-IR i standard analyseområder i NAc-kjernen og -skallet (400 × 600 µm hver; tilleggsfigur 1 ) og ACA av mPFC (600 × 800 µm; tilleggsfigur 3 ) ble manuelt telt av en observatør blindet for forsøksgruppene, i 2 seksjoner per dyr ved bruk av Neurolucida-programvare (MBF Bioscience, Williston, VT) og gjennomsnittet per dyr beregnet. Gruppegjennomsnitt av c-Fos- eller ΔFosB-celler ble sammenlignet ved bruk av toveis ANOVA (faktorer: seksuell erfaring og sexaktivitet) og Fisher LSD for post hoc-sammenligninger ved et signifikansnivå på 0.05.

Eksperiment 2: ΔFosB ekspresjonsmanipulering

Viral vektor-mediert genoverføring

Seksuelt naive hannrotter av typen Sprague Dawley ble tilfeldig delt inn i grupper før stereotaksisk kirurgi. Alle dyrene fikk bilaterale mikroinjeksjoner av rekombinante adeno-assosierte virale (rAAV) vektorer som koder for GFP (kontroll; n=12), villtype ΔFosB (n=11) eller en dominant-negativ bindingspartner for ΔFosB kalt ΔJunD (n=9) i NAc. ΔJunD reduserer ΔFosB-mediert transkripsjon ved kompetitiv heterodimerisering med ΔFosB før binding av AP-1-regionen i genpromotorer ( Winstanley et al . 2007 ). Virustiter ble bestemt ved qPCR og evaluert in vivo før studiestart. Titeren var 1–2 × 10^ 11 infeksiøse partikler per ml. rAAV-vektorer ble injisert i et volum på 1.5 µL/side over 7 minutter (koordinater: AP +1.5, ML +/−1.2 fra Bregma; DV −7.6 fra skalloverflaten i henhold til Paxinos og Watson, 1998) ved bruk av en Hamilton-sprøyte (5 µL; Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA). Vektorene produserer ingen større toksisitet enn kontrollinfusjoner alene ( Winstanley et al., 2007 ; for detaljer om AAV-preparering, se Hommel et al., 2003 ). Atferdseksperimenter startet 3 uker etter vektorinjeksjoner, noe som muliggjorde optimal og stabil virusinfeksjon ( Wallace et al . 2008 ). Transgenekspresjon hos murine arter når toppen etter 10 dager og forblir forhøyet i minst 6 måneder ( Winstanley et al . 2007 ). Ved slutten av eksperimentet ble dyrene transkardielt perfusert, og NAc-seksjoner ble immunbehandlet for GFP (1:20K; kanin-anti-GFP-antistoff; Molecular Probes) ved bruk av en ABC-peroksidase-DAB-reaksjon (som beskrevet ovenfor) for å histologisk verifisere injeksjonssteder ved bruk av GFP som markør ( tilleggsfigur 4 ). ΔFosB- og ΔJunD-vektorer inneholder også et segment som uttrykker GFP, atskilt av et internt ribosomalt inngangssted, noe som muliggjør verifisering av injeksjonssted ved GFP-visualisering hos alle dyr. Bare dyr med injeksjonssteder og spredning av virus begrenset til NAc ble inkludert i statistiske analyser. Spredning av virus var generelt begrenset til en del av NAc og spredte seg ikke rostralt-kaudalt gjennom kjernen. Dessuten virket spredning av virus stort sett begrenset til enten skall eller kjerne. Variasjonen av injeksjonssteder og spredning i NAc påvirket imidlertid ikke effektene på atferd. Til slutt påvirket ikke GFP-injeksjoner seksuell atferd eller erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell atferd sammenlignet med ikke-kirurgiske dyr fra tidligere studier ( Balfour et al . 2004 ).

Seksuell adferd

Tre uker etter virusvektiver ble dyrene parret til en utløsning (eller for 1 time) for 4 sammenhengende, daglige parringsøkter for å oppnå seksuell erfaring (erfaringsøkter) og ble senere testet for langsiktig uttrykk for erfaringsfremkalt tilrettelegging av seksuell oppførsel 1 og 2 uker (test sesjoner 1 og 2) etter den endelige opplevelsesøkten. Seksuelle oppførselsparametere ble registrert under alle parringsøkter som beskrevet ovenfor. Statistiske forskjeller for alle parametere under hver paringsøkt ble sammenlignet i og mellom grupper ved bruk av toveis gjentatte tiltak ANOVAs (Faktorer: behandling og parringssesjon) eller enveis ANOVAs (ejakulasjons latens, antall mounts og intromissjoner; Faktor: behandling eller parring økt) etterfulgt av Fisher LSD eller Newman-Keuls tester for post-hoc sammenligninger på et signifikansnivå av 0.05. Spesielt ble de tilretteleggende effektene av seksuell erfaring på parringsparametere sammenlignet mellom erfaringsøkt 1 (naiv) og erfaringsøkter 2, 3 eller 4 hver, samt mellom eksperimentelle grupper innenfor hver opplevelsesøkt. Videre, for å analysere effekter av behandling (vektor) på langsiktig tilrettelegging av seksuell oppførsel, ble parringsparametere sammenlignet mellom erfaringsøkt 4 og testøkt 1 og 2 innen hver behandlingsgruppe, og sammenlignet mellom eksperimentelle grupper i hver testsesjon.

RESULTATER

Seksuell erfaring forårsaker ΔFosB akkumulering

I utgangspunktet ble det utført en semi-kvantitativ undersøkelse av ΔFosB-akkumulering i hele hjernen hos seksuelt erfarne menn sammenlignet med seksuelt naive kontrollpersoner. En oppsummering av de samlede funnene er gitt i tabell 1. ΔFosB-IR-analyse ble videreutviklet ved å bestemme antallet ΔFosB-IR-celler i flere limbisk-assosierte hjerneområder ved bruk av standard analyseområder. Figur 1 viser representative bilder av DAB-Ni som farger NAc hos seksuelt naive og erfarne dyr. Signifikant ΔFosB-oppregulering ble funnet i mPFC-subregioner ( figur 2A ), NAc-kjerne og -skall (2B), putamen caudatus (2B) og VTA (2C). I NAc eksisterte det signifikante forskjeller på alle rostralt-kaudale nivåer i NAc-kjernen og -skallet, og dataene vist i figur 2 er gjennomsnittet over alle rostro-kaudale nivåer. Derimot var det ingen signifikant økning i ΔFosB-IR i den hypothalamiske mediale preoptiske kjernen (NNS: Gj.sn. 1.8 +/− 0.26; ENS: Gj.sn. 6.0 +/− 1.86).

Figur 1    

 

Representative bilder som viser ΔFosB-IR-celler (svart) i NAc av naivt ingen kjønn (A) og opplever ingen sex (B) grupper. aco: anterior commissure Skalbjelke angir 100 μm.
Figur 2      

Antall ΔFosB-IR celler i: A. infralimbic (IL), prelimbic (PL) og anterior cingulate cortex (ACA) delregioner av medial prefrontal cortex; B. Nucleus accumbens kjernen og skallet, og caudate putamen (CP); C. Rostral, midt, caudal og hale ...

Seksuell erfaring demper parring-indusert c-Fos

Effekten av seksuell erfaring på ΔFosB-nivåer i NAc ble bekreftet ved bruk av fluorescensfargingsteknikker. I tillegg ble effekter av seksuell erfaring på ekspresjon av c-Fos analysert. Figur 3 demonstrerer representative bilder av ΔFosB- (grønn) og c-Fos (rød) -IR-celler i alle eksperimentelle grupper (A, NNS; B, NS; C; ENS; D, ES). Seksuell erfaring økte betydelig ΔFosB-uttrykk i NAc-kjernen (Figur 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) og skallet (Figur 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Derimot hadde parring 1 time før perfusjon ikke en effekt på FFosB-ekspresjon (Figur 4A, C) og ingen interaksjon mellom seksuell erfaring og parring umiddelbart før perfusjon ble påvist. Det var en generell effekt av parring før perfusjon på c-Fos-uttrykk i både NAc-kjernen (Figur 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) og skall (Figur 4D: F1,15 = 39.4; p <0.001). Videre ble en samlet effekt av seksuell opplevelse oppdaget i NAc-kjernen (Figur 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) og skallet (Figur 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) og en interaksjon mellom seksuell erfaring og parring før perfusjon ble detektert i NAc-kjernen (F1,15 = 6.5; p = 0.022), med en trend i skallet (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post-hoc analyser demonstrerte parring-indusert c-Fos ekspresjon i kjerne og skall av seksuelt naive menn (Figur 4B, D). Men hos seksuelt erfarne menn var c-Fos ikke signifikant økt i NAc-kjernen (Figur 4B) og betydelig dempet i skallet (Figur 4D). Dermed forårsaket seksuell erfaring en reduksjon av parringsinducert c-Fos-ekspresjon. P-verdier for spesifikke parvise sammenligninger er i figurlegenden.

Figur 3      

Representative bilder som viser ΔFosB (grønn) og c-Fos (rød) i NAc for hver eksperimentell gruppe. Skalestang angir 100 μm.
Figur 4      

Sex erfaring-indusert ΔFosB og parringsinducerte c-Fos. Antall immunofreaktive celler for ΔFosB (Core, A, Shell, C, ACA, E) eller c-Fos (Core, B, Shell, D, ACA, F): NNS (n = 5), NS 5), ENS (n = 5) eller ES (n = 4). Data er uttrykt ...

Effekten av seksuell erfaring på paringsinduserte c-Fos-nivåer var ikke begrenset til NAc. En lignende demping av c-Fos-ekspresjon ble observert i ACA hos seksuelt erfarne dyr sammenlignet med seksuelt naive kontroller. Seksuell erfaring hadde en signifikant effekt på ΔFosB-ekspresjon i ACA ( figur 4E : F 1,15 = 154.2; p < 0.001). Paring før perfusjon hadde ingen effekt på ΔFosB-ekspresjon ( figur 4C ), men økte c-Fos signifikant ( figur 4F : F 1,15 = 203.4; p < 0.001) i ACA. Dessuten ble paringsindusert c-Fos-ekspresjon i ACA signifikant redusert av seksuell erfaring ( figur 4F : F 1,15 = 15.8; p = 0.001). En toveis interaksjon mellom seksuell erfaring og paring før perfusjon ble oppdaget for c-Fos-ekspresjon ( figur 4F : F 1,15 = 15.1; p < 0.001). P-verdier for spesifikke parvise sammenligninger er vist i figurforklaringene. Til slutt var det ingen signifikant reduksjon i paringsindusert c-Fos-ekspresjon i den mediale preoptiske kjernen (NS: Gj.sn. 63.5 +/− 4.0; ES: Gj.sn. 41.4 +/− 10.09), et område der paringserfaring ikke forårsaket en signifikant økning i ΔFosB-ekspresjon, noe som indikerer at paringsindusert c-Fos-ekspresjon ikke ble påvirket i alle hjerneområder.

ΔFosB i NAc formidler forsterkning av seksuell oppførsel

For å undersøke en potensiell molekylær mekanisme for forsterkning av seksuell atferd som demonstrert av erfaringsinduisert tilrettelegging av seksuell oppførsel, ble virkninger av lokal manipulering av ΔFosB-nivåer og dens transkripsjonsaktivitet bestemt. Seksuell erfaring i løpet av de fire påfølgende opplevelsesøktene hadde en signifikant effekt på fjellets latensitet (Figur 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), intromissjonslatens (Figur 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) og utløsningslatens (Figur 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP-kontrolldyr viste den forventede erfaring-induserte tilretteleggingen av seksuell oppførsel og viste signifikant lavere latenser til første montering, første intromisjon og utløsning under erfaringsøkt 4 sammenlignet med erfaringsøkt 1 (Figur 5A-C; se figurlegenden for p-verdier). Denne opplevelsesinducerte tilretteleggingen av seksuell oppførsel ble også observert i ΔFosB-gruppen for montering og intromissjonslatensier, men det var ikke signifikant forskjell oppdaget i ejakulasjonslatensiteten (Figur 5A-C). I kontrast viste ΔJunD dyr en stunted facilitation; Selv om latensene for mounts, intromissions og ejaculations ble redusert med gjentatte parringsøkter, oppnådde ingen av disse parameterne statistisk signifikans når de sammenlignet mellom erfaringsøkter 1 og 4 (Figur 5A-C). Mellom gruppesammensetninger for hver opplevelsessession viser at ΔJunD hadde betydelig lengre latens for å montere, intromitere og ejakulere i løpet av erfaringsøktene sammenlignet med ΔFosB og GFP (Figur 5A-C). I tillegg hadde både seksuell erfaring og behandling betydelige effekter på kopulasjonseffektivitet (Figur 5F: seksuell opplevelse, F1,12 = 22.5; p <0.001; behandling, F1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB hanner hadde økt koplingseffektivitet under opplevelsesøkt 4 sammenlignet med opplevelsesøkt 1 (Figur 5F). I tillegg hadde ΔFosB dyr signifikant færre fester som foregikk før utløsning i løpet av opplevelsesøksdagen 4, sammenlignet med erfaringsøkt 1 (Figur 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004), og at ΔJunD hanner hadde betydelig flere fester som foregikk før utløsning, og dermed signifikant redusert koplingseffektivitet, enn noen av de andre to gruppene (Figur 5D og F). Dermed viste GFP og ΔFosB dyr erfaring-inducerte tilrettelegging av initiering av seksuell oppførsel og seksuell ytelse, mens ΔJunD-dyr ikke gjorde det.

Figur 5      

Seksuell oppførsel av GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) og ΔJunD (n = 9) dyr: monteringslatens (A), intromissjonslatens (B), ejakulasjonslatens (C), antall monteringer (D), antall intromissjoner (E) og kopuleringseffektivitet (F). Data er uttrykt ...

For å teste hypotesen om at ΔFosB-ekspresjon er kritisk for langsiktig uttrykk av erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell atferd, ble dyrene testet 1 uke (testøkt 1) og 2 uker (testøkt 2) etter den siste erfaringsøkten. Tilrettelagt seksuell atferd ble faktisk opprettholdt i både GFP- og ΔFosB-gruppene, da ingen av atferdsparametrene var forskjellige mellom testøkt 1 eller 2 og den siste erfaringsøkten 4, innenfor GFP- og ΔFosB-gruppene ( figur 5A–C ; bortsett fra ejakulasjonslatens og kopulasjonseffektivitet i testøkt 1 for ΔFosB-dyr). Signifikante forskjeller mellom ΔJunD-dyr og GFP- eller ΔFosB-grupper ble oppdaget i begge testøktene for alle seksuelle atferdsparametere ( figur 5A–F ). Det ble ikke oppdaget noen forskjeller mellom eller innenfor gruppene når man sammenlignet antall intromisjoner, PEI eller prosentandeler av dyr som ejakulerte (100 % av hannene i alle gruppene ejakulerte i løpet av de fire siste paringsøktene).

DISKUSJON

Den nåværende studien viste at seksuell erfaring forårsaker en akkumulering av ΔFosB i flere limbisk-assosierte hjerneområder, inkludert NAc-kjernen og -skallet, mPFC, VTA og putamen caudatus. I tillegg dempet seksuell erfaring parringsindusert uttrykk av c-Fos i NAc og ACA. Til slutt ble ΔFosB i NAc vist å være kritisk for å mediere tilrettelegging av paring under tilegnelse av seksuell erfaring og den langsiktige uttrykkelsen av erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell atferd . Spesifikt dempet reduksjon av ΔFosB-mediert transkripsjon erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell motivasjon og ytelse, mens overekspresjon av ΔFosB i NAc forårsaket en forbedret tilrettelegging av seksuell atferd, i form av økt seksuell ytelse med mindre erfaring. Samlet sett støtter de nåværende funnene hypotesen om at ΔFosB er en kritisk molekylær mediator for den langsiktige nevrale og atferdsmessige plastisiteten indusert av seksuell erfaring.

De nåværende funnene utvider tidligere studier som viser sexerfaringsindusert ΔFosB i NAc hos hannrotter ( Wallace et al . 2008 ) og hunnhamstere ( Hedges et al . 2009 ). Wallace et al. (2008) viste at overekspresjon av rAAV-ΔFosB i NAc forbedret seksuell atferd hos seksuelt naive dyr under den første paringsøkten, noe som fremgår av færre introduksjoner til ejakulasjon og kortere intervaller etter ejakulasjon, men hadde ingen effekt hos seksuelt erfarne hanner ( Wallace et al . 2008 ).

I motsetning til dette viste den nåværende studien ingen effekter av ΔFosB-overekspresjon hos seksuelt naive menn under den første testen, men snarere under og etter tilegnelsen av seksuell erfaring. ΔFosB-overekspressorer viste økt seksuell ytelse (økt kopulasjonseffektivitet) sammenlignet med GFP-dyr.

I tillegg testet den nåværende studien rollen til ΔFosB ved å blokkere ΔFosB-mediert transkripsjon ved hjelp av en ΔJunD-uttrykkende viral vektor. Forebygging av erfaringsindusert økning i ΔFosB-ekspresjon hemmet erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell motivasjon (økt opphopnings- og intromisjonslatens) samt seksuell ytelse (økt ejakulasjonslatens og antall opphopninger) og påfølgende langsiktig uttrykk av tilrettelagt seksuell atferd.

Disse dataene er derfor de første som indikerer en obligatorisk rolle for ΔFosB i tilegnelsen av erfaringsindusert tilrettelegging av seksuell atferd. Dessuten viser disse dataene at ΔFosB også er kritisk involvert i den langsiktige uttrykkelsen av erfaringsindusert tilrettelagt atferd. Vi foreslår at denne langsiktige uttrykkelsen av tilrettelagt atferd representerer en form for hukommelse for naturlig belønning, og dermed er ΔFosB i NAc en mediator av belønningshukommelse. Seksuell erfaring økte også ΔFosB-nivåene i VTA og mPFC, områder involvert i belønning og hukommelse ( Balfour et al . 2004 ; Phillips et al . 2008 ). Fremtidige studier er nødvendige for å belyse en potensiell betydning av ΔFosB-oppregulering i disse områdene for belønningshukommelse.

ΔFosB-uttrykk er svært stabil, og har derfor stort potensial som en molekylær mediator av vedvarende tilpasninger av hjernen etter kroniske forstyrrelser (nestler et al. 2001). ΔFosB har vist seg å øke gradvis i NAc over flere kokaininjeksjoner og vedvarer i opptil flere uker (Håper et al. 1992; Håper et al. 1994). Disse endringene i NAc ΔFosB-uttrykk er forbundet med legemiddelbelønningssensibilisering og avhengighet (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). I motsetning til dette er rollen som ΔFosB i formidling av naturlig belønning blitt understudied. Nylige bevis har oppdaget at ΔFosB induksjon i NAc er involvert i naturlig belønning. ΔFosB nivåer økes tilsvarende i NAc etter sukroseinntak og hjulløp. Overuttrykket av ΔFosB i striatumet ved bruk av bitransgene mus eller virusvektorer i rotter forårsaker en økning i sukroseinntaket, økt motivasjon for mat og økt spontan hjulkjøring (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). De nåværende dataene legger vesentlig til disse rapportene og støtter videre ideen om at ΔFosB er en kritisk mediator for belønning forsterkning og naturlig belønning minne.

ΔFosB kan mediere erfaringsindusert forsterkning av seksuell atferd via induksjon av plastisitet i det mesolimbiske systemet. Seksuell erfaring forårsaker faktisk en rekke langvarige endringer i det mesolimbiske systemet ( Bradley & Meisel 2001 ; Frohmader et al . 2009 ; Pitchers et al . 2010 ). På atferdsnivå har en sensibilisert lokomotorisk respons på amfetamin og en forbedret amfetaminbelønning blitt vist hos seksuelt erfarne hannrotter ( Pitchers et al . 2010 ); en endret lokomotorisk respons på amfetamin har også blitt observert hos hunnhamstere ( Bradley & Meisel 2001 ). Videre har det blitt funnet økning i antall dendrittiske ryggrader og kompleksitet av dendrittiske bulter etter en periode med avholdenhet fra seksuell erfaring hos hannrotter ( Pitchers et al . 2010 ) . Den nåværende studien antyder at ΔFosB kan være en spesifikk molekylær mediator av de langsiktige utfallene av seksuell erfaring. I samsvar med dette har ΔFosB nylig vist seg å være viktig for å indusere endringer i dendrittisk ryggrad som respons på kronisk kokainadministrasjon ( Dietz et al . 2009 ; Maze et al . 2010 ).

Det er ikke klart hvilken(e) oppstrøms nevrotransmitter(e) som er ansvarlig(e) for å indusere ΔFosB i NAc, men DA har blitt foreslått som en kandidat ( Nye et al . 1995 ). Så å si alle misbruksmidler, inkludert kokain, amfetamin, opiater, cannabinoider og etanol, samt naturlige belønninger, øker ΔFosB i NAc ( Perrotti et al . 2005 ; Wallace et al . 2008 ; Werme et al . 2002 ). Både misbruksmidler og naturlige belønninger øker synaptisk DA-konsentrasjon i NAc ( Damsma et al . 1992 ; Hernandez & Hoebel 1988a , b ; Jenkins & Becker 2003 ). ΔFosB-induksjon av misbruksmidler har blitt vist i DA-reseptorholdige celler, og kokainindusert ΔFosB blokkeres av en D1 DA-reseptorantagonist ( Nye et al . 1995 ). Derfor antas det at DA-frigjøring stimulerer ΔFosB-ekspresjon og dermed medierer belønningsrelatert nevroplastisitet . Funnet om at hjerneområder der seksuell opplevelse endret ΔFosB-nivåer, mottar sterk dopaminerg input fra VTA, inkludert mediale prefrontale cortex og basolateral amygdala , støtter ytterligere ideen om at ΔFosB-nivåer er DA-avhengige .

Imidlertid økes ikke ΔFosB i det mediale preoptiske området, selv om dette området mottar dopaminerg input, om enn fra hypothalamiske kilder ( Miller & Lonstein 2009 ). Fremtidige studier er nødvendige for å teste om paringsindusert ΔFosB-ekspresjon og effektene av seksuell erfaring på seksuell motivasjon og ytelse er avhengig av DA-virkning. Rollen til DA i seksuell belønning hos hannrotter er foreløpig ikke helt klar ( Agmo & Berenfeld 1990 ; Pfaus 2009 ). Det finnes rikelig med bevis for at DA frigjøres i NAc under eksponering for en hunnrotte eller paring ( Damsma et al . 1992 ), og DA-nevroner aktiveres under seksuell atferd ( Balfour et al . 2004 ). Systemiske injeksjoner av DA-reseptorantagonist forhindrer imidlertid ikke seksuell belønningsindusert betinget stedspreferanse ( Agmo & Berenfeld 1990 ), og hypotesen om at DA er kritisk for erfaringsindusert forsterkning av paring er uprøvd.

Det er også uklart hva som er nedstrøms mediatorer av ΔFosB effekter på seksuell oppførsel. ΔFosB har vist seg å fungere som både en transkripsjonal aktivator og repressor gjennom en AP-1-avhengig mekanisme (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Tallrike målgener har blitt identifisert, inkludert det umiddelbare tidlige gen c-fos (Håper et al. 1992; Håper et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dynorphin (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), NFκB-underenheter (Ang et al. 2001), Ennd AMPA glutamatreseptor GluR2-underenheten (Kelz et al. 1999). De nåværende resultatene viser at parringsinducerte c-Fos-nivåer ble redusert ved seksuell erfaring i hjerneområder med økt ΔFosB (NAc og ACA). Undertrykkelsen av c-Fos ser ut til å være avhengig av perioden siden siste parring og gjentatte parringsøkter, som i tidligere studier, ble en slik reduksjon i c-Fos ikke påvist i hanrotter som ble testet 1 uke etter den avsluttende parringsøkten (Balfour et al. 2004) eller etter seksuell opplevelse som består av bare en enkelt parringsøkt (Lopez & Ettenberg 2002). Videre er det nåværende funnet i samsvar med bevisene for at ΔFosB undertrykker c-fos-genet etter kronisk amfetamineksponering (Renthal et al. 2008). I tråd med disse funnene ble induksjonen av flere umiddelbare, tidlige gen-mRNAer (c-fos, fosB, c-jun, junB og zif268) redusert ved gjentatte kokaininjeksjoner sammenlignet med akutte legemiddelinjeksjoner (Håper et al. 1992; Håper et al. 1994), og amfetamin-indusert c-fos ble undertrykt etter uttak fra kronisk amfetaminadministrasjon (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Den funksjonelle relevansen av nedreguleringen av c-Fos-uttrykk etter kronisk medisinbehandling eller seksuell erfaring forblir uklar og har blitt foreslått å være en viktig homøostatisk mekanisme for å regulere et dyrs følsomhet overfor gjentatt belønningsposisjon (Renthal et al. 2008).

Avslutningsvis viser den nåværende studien at ΔFosB i NAc spiller en integrert rolle i hukommelsen om seksuell belønning, noe som støtter muligheten for at ΔFosB er viktig for generell belønningsforsterkning og hukommelse . Funnene fra den nåværende studien belyser ytterligere vår forståelse av cellulære og molekylære mekanismer som medierer seksuell belønning og motivasjon, og bidrar til en mengde litteratur som viser at ΔFosB er en viktig aktør i utviklingen av avhengighet, ved å demonstrere en rolle for ΔFosB i naturlig belønningsforsterkning.

Tilleggsmateriale

Supp Fig S1-S4 & Tabell S1-S2

Takk til

Denne forskningen ble støttet av tilskudd fra de kanadiske instituttene for helseforskning til LMC, National Institute of Mental Health til EJN, og Canadas naturvitenskaps- og ingeniørvitenskapsråd til KKP og LMC.

REFERANSER

  1. Agmo A. Mannlig rotte seksuell oppførsel. Brain Res Brain Res Protoc. 1997, 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Forsterkende egenskaper av ejakulasjon i hannrotten: Opioids og dopaminers rolle. Behav Neurosci. 1990, 104: 177-182. [PubMed]
  3. Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induksjon av kjernefaktor-kappaB i kjernen accumbens ved kronisk kokainadministrasjon. J Neurochem. 2001, 79: 221-224. [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksuell oppførsel og sexrelaterte miljøklipper aktiverer mesolimbic systemet hos hannrotter. Neuropsychopharmacology. 2004, 29: 718-730. [PubMed]
  5. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Effekter av kronisk eksponering for kokain reguleres av nevronproteinet Cdk5. Natur. 2001, 410: 376-380. [PubMed]
  6. Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopaminslesjoner hos kvinnelige hamstere (Mesocricetus auratus) avskaffer de sensibiliserte effektene av seksuell erfaring på kopulerende interaksjoner med menn. Behav Neurosci. 2005, 119: 224-232. [PubMed]
  7. Bradley KC, Meisel RL. Seksuell atferd induksjon av c-Fos i kjernen accumbens og amfetaminstimulert lokomotorisk aktivitet er sensitized av tidligere seksuell erfaring i kvinnelige syriske hamstere. J Neurosci. 2001, 21: 2123-2130. [PubMed]
  8. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomavhengige og uavhengige mekanismer for FosB destabilisering: identifisering av FosB degron domener og implikasjoner for DeltaFosB stabilitet. Eur J Neurosci. 2007, 25: 3009-3019. [PubMed]
  9. Chao J, Nestler EJ. Molekylær nevrobiologi av narkotikamisbruk. Annu Rev Med. 2004, 55: 113-132. [PubMed]
  10. Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Håper BT, Nestler EJ. Regulering av delta FosB og FosB-lignende proteiner ved elektrokonvulsiv anfall og kokainbehandling. Molekylær farmakologi. 1995, 48: 880-889. [PubMed]
  11. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal celletype-spesifikk overekspresjon av DeltaFosB øker incitamentet til kokain. J Neurosci. 2003, 23: 2488-2493. [PubMed]
  12. Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Sentral regulering av utløsning. Fysiol Behav. 2004, 83: 203-215. [PubMed]
  13. Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksuell oppførsel øker dopaminoverføringen i kjernen accumbens og striatum av hannrotter: sammenligning med nyhet og lokomotiv. Behav Neurosci. 1992, 106: 181-191. [PubMed]
  14. Dietz DM, Maze I, Mekaniker M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Vesentlig rolle for ΔFosB i kokainregulering av dendritiske spines av nukleinsystemer. Samfunnet for Neurovidenskapens Sammendrag. 2009
  15. Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Blanding fornøyelser: Gjennomgang av stoffets effekter på kjønnsadferd i mennesker og dyremodeller. Horm Behav. 2009 I trykk.
  16. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB overekspresjon i kjernen accumbens forbedrer seksuell belønning i kvinnelige syriske hamstere. Genes Brain Behav. 2009, 8: 442-449. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  17. Hernandez L, Hoebel BG. Feeding og hypothalamisk stimulering øker dopaminomsetningen i accumbens. Fysiol Behav. 1988a, 44: 599-606. [PubMed]
  18. Hernandez L, Hoebel BG. Matbelønning og kokain øker ekstracellulær dopamin i kjernen accumbens målt ved mikrodialyse. Life Sci. 1988b, 42: 1705-1712. [PubMed]
  19. Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Vesentlig rolle for fosB-genet i molekylære, cellulære og adferdshandlinger av kroniske elektrokonvulsive anfall. J Neurosci. 1998, 18: 6952-6962. [PubMed]
  20. Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokalt genknockdown i hjernen ved hjelp av viral-mediert RNA-forstyrrelse. Nat Med. 2003, 9: 1539-1544. [PubMed]
  21. Håper B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulering av umiddelbar tidlig genuttrykk og AP-1 binding i rottekjernen accumbens av kronisk kokain. Proc Natl Acad Sci USA A. 1992; 89: 5764-5768. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  22. Håper BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induksjon av et langvarig AP-1-kompleks bestående av endrede Fos-lignende proteiner i hjernen ved kronisk kokain og andre kroniske behandlinger. Neuron. 1994, 13: 1235-1244. [PubMed]
  23. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mannlig seksuell adferd. Horm Behav. 2002, 1: 1-139.
  24. Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akutte og kroniske amfetaminbehandlinger regulerer differensielt neuropeptid messenger-RNA-nivåer og Fos immunoreaktivitet i råtta striatalneuroner. Neuroscience. 1995, 65: 1041-1050. [PubMed]
  25. Jenkins WJ, Becker JB. Dynamiske økninger i dopamin under stimulering i hunrotter. Eur J Neurosci. 2003, 18: 1997-2001. [PubMed]
  26. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Ekspresjon av transkripsjonsfaktoren deltaFosB i hjernen styrer følsomheten for kokain. Natur. 1999, 401: 272-276. [PubMed]
  27. Lopez HH, Ettenberg A. Eksponering for hunrotter produserer forskjeller i c-fos-induksjon mellom seksuelt naive og erfarne hannrotter. Brain Res. 2002, 947: 57-66. [PubMed]
  28. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mekaniker M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Viktig rolle av histon-metyltransferasen G9a i kokaininducert plastisitet. Vitenskap. 2010, 327: 213-216. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  29. McClung CA, Nestler EJ. Regulering av genuttrykk og kokainbelønning av CREB og DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003, 6: 1208-1215. [PubMed]
  30. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylær bryter for langsiktig tilpasning i hjernen. Brain Res Mol Brain Res. 2004, 132: 146-154. [PubMed]
  31. Miller SM, Lonstein JS. Dopaminergiske fremspring til det medial preoptiske området av postpartum rotter. Neuroscience. 2009, 159: 1384-1396. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  32. Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkripsjonskobling i nevroner: rolle av cellulære umiddelbare tidlig-gener. Trender Neurosci. 1989, 12: 459-462. [PubMed]
  33. Nestler EJ. Molekylære mekanismer av narkotikamisbruk. Neuropharmacology. 2004; 47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
  34. Nestler EJ. Neurobiologi av kokainavhengighet. Sci Pract Perspect. 2005, 3: 4-10. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  35. Nestler EJ. Anmeldelse. Transkripsjonelle avhengighetsmekanismer: DeltaFosBs rolle. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008, 363: 3245-3255. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  36. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: en vedvarende molekylær bryter for avhengighet. Proc Natl Acad Sci USA A. 2001; 98: 11042-11046. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  37. Nye HE, Håper BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiske studier av regulering av kronisk FOS-relatert antigeninduksjon av kokain i striatum og nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995, 275: 1671-1680. [PubMed]
  38. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB i kjernen accumbens regulerer matforsterket instrumentell oppførsel og motivasjon. J Neurosci. 2006, 26: 9196-9204. [PubMed]
  39. Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducible, hjernegionspesifikke uttrykk for en dominant negativ mutant av c-Jun i transgene mus reduserer følsomheten for kokain. Brain Res. 2003, 970: 73-86. [PubMed]
  40. Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB akkumuleres i en GABAergic cellepopulasjon i den bakre halen av det ventrale tegmentale området etter psykostimulerende behandling. Eur J Neurosci. 2005, 21: 2817-2824. [PubMed]
  41. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Induksjon av deltaFosB i belønningsrelaterte hjernestrukturer etter kronisk stress. J Neurosci. 2004, 24: 10594-10602. [PubMed]
  42. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distinkte mønstre av DeltaFosB induksjon i hjernen av misbruk. Synapse. 2008, 62: 358-369. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  43. Pfaus JG. Veier av seksuell lyst. J Sex Med. 2009, 6: 1506-1533. [PubMed]
  44. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Tilstand og seksuell oppførsel: en anmeldelse. Horm Behav. 2001, 40: 291-321. [PubMed]
  45. Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Et topp-ned perspektiv på dopamin, motivasjon og minne. Pharmacol Biochem Behav. 2008, 90: 236-249. [PubMed]
  46. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticitet i mesolimbic systemet fremkalt av naturlig belønning og etterfølgende belønning avholdenhet. Biolpsykiatri. 2010, 67: 872-879. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  47. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB medierer epigenetisk desensibilisering av c-fos-genet etter kronisk amfetamineksponering. J Neurosci. 2008, 28: 7344-7349. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  48. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Gjennomsøkende analyse av kromatinregulering av kokain avslører en rolle for sirtuins. Neuron. 2009, 62: 335-348. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  49. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuell belønning i hannrotter: effekter av seksuell erfaring på betingede stedpreferanser assosiert med utløsning og intromissjoner. Horm Behav. 2009, 55: 93-97. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  50. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylering av DeltaFosB medierer dens stabilitet in vivo. Neuroscience. 2008
  51. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulering av DeltaFosB stabilitet ved fosforylering. J Neurosci. 2006, 26: 5131-5142. [PubMed]
  52. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosBs innflytelse i kjernen accumbens på naturlig belønningsrelatert oppførsel. J Neurosci. 2008, 28: 10272-10277. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
  53. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB regulerer hjulkjøring. J Neurosci. 2002, 22: 8133-8138. [PubMed]
  54. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-induksjon i orbitofrontal cortex medierer toleranse mot kokain-indusert kognitiv dysfunksjon. J Neurosci. 2007, 27: 10497-10507. [PubMed]
  55. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. En viktig rolle for DeltaFosB i kjernen accumbens i morfin handling. Nat Neurosci. 2006, 9: 205-211. [PubMed]
  56. Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos letter oppkjøpet og utryddelsen av kokaininducerte vedvarende endringer. J Neurosci. 2006, 26: 13287-13296. [PubMed]